Contrôle de la contamination dans les laboratoires médicaux

Dans un laboratoire médical, le risque de contamination des cultures cellulaires est incalculable – quelle que soit la minutie du travail. Il n'est certainement pas rare que les risques soient mal calculés et la contamination entraîne souvent une perte de culture. Par conséquent, dans ce blog, nous aimerions faire la lumière sur la façon de détecter et d'éviter systématiquement la contamination dans les lignées cellulaires.

Chaque laboratoire médical est menacé jour après jour
La contamination microbienne dans les cultures cellulaires, y compris celles achetées auprès de tiers, n'est pas rare dans les laboratoires. En fait, c'est le contraire qui est vrai : de nombreuses lignées cellulaires cultivées en laboratoire sont infectées par des mycoplasmes. De minuscules spores fongiques sont omniprésentes et peuvent se propager dans l'air. Bien sûr, lorsque vous travaillez dans un environnement stérile, il y a de la place pour l'erreur humaine. Il est facile de faire une erreur.

Scénarios d'horreur dans les laboratoires de culture cellulaire - contaminations de tous types :
Contamination microbienne (bactéries, mycoplasmes, champignons, levures, etc.) contamination
virale contamination protéique
(prions) contamination par d'autres cultures cellulaires


D'où vient la pollution ?
1. Dans quelle mesure la culture d'origine est-elle "propre" ?

Les problèmes commencent souvent avec le matériel source. Même avec tous les efforts possibles dans la production de milieux, certains matériaux ne peuvent pas être rendus complètement stériles. Par conséquent, il existe toujours un risque que des mycoplasmes s'échappent du filtre stérile. Les prions peuvent même survivre à la stérilisation à la vapeur à 121 °C.

2. Le laboratoire de travail est-il vraiment un environnement stérile ?

L'une des principales causes de contamination en laboratoire est le corps humain. Par exemple, de nombreux cas de contamination croisée pourraient être évités si les techniciens de laboratoire évitaient de manipuler plusieurs lignes de production en même temps sur le banc stérile. Une culture peut rapidement en infecter une autre si le liquide n'est pas manipulé correctement.

De plus, précipiter les choses est le pire ennemi du travail ennuyeux. La porte de l'incubateur de laboratoire ne doit pas être ouverte sans raison, et bien sûr, elle ne doit pas rester ouverte trop longtemps. Quelle que soit la pression temporelle sous laquelle ils peuvent être, les techniciens de laboratoire ne doivent travailler que sur une seule lignée cellulaire à la fois. Lors du déballage des pipettes jetables sous la paillasse, le bouchon doit être mis de côté après dévissage.

3. Utilisez-vous le bon équipement de laboratoire ?

Bien sûr, même l'équipement utilisé dans les laboratoires médicaux est tout à fait susceptible de provoquer une contamination dans la culture cellulaire. Par conséquent, nous recommandons :

Utiliser des récipients en plastique sans plastifiant
Choisir un emplacement approprié pour l'incubateur (un emplacement près du lavabo peut entraîner une contamination par le savon)
Utiliser des accessoires d'incubateur en cuivre stérilisé
. Lorsque des antibiotiques sont utilisés, des lignées sans antibiotiques doivent être cultivées de temps en temps. (En effet, les antibiotiques peuvent masquer la contamination et l'infection peut se propager.)
Quelles méthodes d'investigation peuvent être utilisées pour suivre quelles infections ?
L'un des aspects les plus dangereux des infections à mycoplasmes est qu'elles passent souvent inaperçues pendant longtemps. En principe, les événements de pollution peuvent être contrôlés et suivis par une variété de méthodes, certaines très sophistiquées et d'autres moins.

Un technicien de laboratoire expérimenté peut dire si une contamination croisée s'est produite simplement en regardant sous un microscope.
Si nous extrayons tout l'ADN d'une culture cellulaire, la méthode PCR peut être utilisée pour détecter son contenu en ADN de mycoplasme.
Les laboratoires effectuant une transduction virale ou des essais biologiques doivent également vérifier la contamination virale.
Les laboratoires fabriquant des médicaments pour de nouvelles thérapies doivent vérifier le faible risque de bactéries, de spores, de champignons, de mycoplasmes, de VIH, de VHC et d'ESB.

Comment traiter la pollution ?
Chaque cas de contamination doit être documenté et classé. Au moins, les laboratoires médicaux qui cachent les problèmes de pollution mettent en péril leur bonne réputation.

Bien entendu, des mesures particulières de nettoyage doivent également être prises en cas de contamination : en cas d'infections fongiques, il convient de vérifier que le laboratoire est régulièrement désinfecté avec un produit à base d'alcool.
En règle générale, une désinfection régulière par pulvérisation ou essuyage des l' intérieur de l' incubateur scientifique avec une solution à base d'alcool aide à éviter la contamination
La stérilisation mensuelle à l'air chaud est une pratique médicale courante dans de nombreux laboratoires
. Pour les cellules souches sensibles, ce n'est que dans de rares cas que les lignées cellulaires infectées peuvent être traitées avec des antibiotiques. Dans la plupart des cas, la solution est coûteuse - la culture doit être abandonnée et le travail doit être recommencé à zéro
en conclusion :
Être capable de détecter, de valider et de traiter la contamination de manière cohérente est absolument essentiel, en particulier dans les laboratoires médicaux qui travaillent avec des cellules souches très sensibles et n'utilisent pas d'antibiotiques. Une surveillance transparente est essentielle. Couvrir la contamination ou la laisser se propager ne fait qu'augmenter le danger et n'est pas nécessaire. L' incubateur à température constante doit toujours être le composant le plus sûr de toute l'étape du processus ; si un échantillon est contaminé, cela se produit dans la plupart des cas soit en amont, soit en aval de la culture en incubateur de refroidissement .